化学家发展更快，更高效的蛋白质标记

研究人员已经创造了一种特殊工程的哺乳动物细胞，提供了一种新的“化学把手”，这将使研究人员能够更有效地标记感兴趣的蛋白质，而不会破坏蛋白质本身或发现蛋白质的细胞的正常功能。

蛋白质标记被研究人员用于不同领域，以帮助他们了解这些重要分子如何影响细胞的正常功能。目前，通过将蛋白质与其他荧光蛋白融合，研究人员可以利用显微镜来跟踪蛋白质在细胞中的运动，从而对蛋白质进行标记。然而，这种方法有几个缺点，尤其是荧光蛋白往往大到足以影响感兴趣的蛋白的功能。

北卡罗来纳州立大学化学副教授Alex Doiters博士以及同事博士。Jason Chin, Kathrin Lang and Lloyd Davis of the Laboratory of Molecular Biology at the Medical Research Council in Cambridge, U.K., have developed a way to attach a fluorophore – a fluorescent molecule about 20 times smaller than the fluorescent proteins currently in use – to a protein that is expressed in a mammalian cell.

deiter和Chin发展了一个特殊的21^圣他们将氨基酸添加到经过特殊设计的细胞中，将这种氨基酸整合到他们想要研究的蛋白质中(通常只有20种氨基酸)。这21^圣氨基酸有一种“化学把手”，它只与特定设计的荧光团发生反应，而不与任何细胞成分发生反应。根据deiter的说法，“修饰蛋白质和荧光团之间的反应非常快，产量高，并在两个反应伙伴之间产生稳定的链接。这种新方法使以前不可能的细胞生物学研究成为可能。”

这项研究发表在2月5日化学性质．

“我们发现，我们的方法给了我们标记蛋白质的产量更高，并且结合反应比目前方法快50倍，”德伊斯司司表示。“另外，完成反应的试剂较少，因此总体而言，我们具有更快，更有效的蛋白质标记方法，以及干扰所研究的蛋白质和细胞的正常功能的可能性较少。

这项研究由美国国立卫生研究院和美国国家科学基金会资助。化学系是北卡州立大学物理与数学科学学院的一部分。

皮克-

编辑报告:本文摘要如下。

基因编码的降冰片烯通过快速生物正交反应指导位点特异性细胞蛋白标记

作者:Kathrin Lang, Lloyd Davis和Jason W. Chin，英国剑桥山路医学研究委员会分子生物学实验室;Alexander Deiters, Jessica Torres-Kolbus, Chungjung Chou, North Carolina State University

发表: 2012年2月5日化学性质

文摘:
通过遗传密码扩展的生物正交群的位点特异性结合为任何探针的位点特异性标记蛋白提供了一种强大的通用策略。然而，可以编码的生物正交官能团反应迟钝限制了这种策略的应用。我们利用吡咯烷基tRNA合成酶/tRNA证明了去冰片烯氨基酸的遗传编码_CUA对在大肠杆菌和哺乳动物细胞。我们开发了一系列基于四嗪的探针，它们在与降冰片烯快速反应时显示“开启”荧光。我们证明，标签的编码降冰片烯是特定的，与整个可溶性大肠杆菌蛋白质组学，比现有的可编码生物正交反应快数千倍。我们明确地展示了这种方法的优势超过最先进的生物正交反应的蛋白质标签体外和哺乳动物细胞上，并证明哺乳动物细胞表面蛋白质的快速生物正交位点特异性标记。